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kromasil 色谱柱的使用与维护
色谱柱安装与平衡
使用经过滤并脱气的流动相( 不含任何缓冲液) *冲洗hplc 泵和管线，确保系统中没有气泡。按照流向标签( 位于色谱柱上) 指示的方向将色谱柱一端连接至进样器，另一端不接检测器。将泵流速设置为0.1 ml/min( 或系统允许zui低设置) 并在5 分钟内增大至正常流速。
当色谱柱出口处有溶剂自由流出时停止泵送，擦拭出口端并将其连接到检测器。
以正常流速和约10-30 倍色谱柱体积的流动相来平衡色谱柱。
检测柱效
强烈建议用户在收到kromasil 原装jin口色谱柱15 天内进行柱效检测，并在整个使用周期内，
进行定期的柱效测试，以便随时监测色谱柱的寿命情况。
运行参数
5 μm 及3.5 μm 色谱柱最大耐受压力400 bar，2.5 μm 及1.8 μm 色谱柱最大耐受压力1000 bar。最高工作温度不高于60 ℃。在使用kromasil classic 系列c18，c8，c4，phenyl
色谱柱时，流动相ph 控制在1.5-9.5 之间，这样有利于延长色谱柱的使用寿命。
流动相的配置
仅使用hplc 色谱纯溶剂、水、最高纯度的化学品和试剂。
使用前对所有流动相进行过滤和脱气。
确保溶剂可互溶。
色谱柱的保存
色谱柱使用完毕后，应尽可能地冲洗掉残留在色谱柱内的杂质和沉积物。保存在适合的储存溶剂中，储存溶剂可以参考coa 中建议使用溶剂。储存环境需保持温度稳定、避光，并注意检查peek堵头，防止松动导致柱内溶剂流失。
色谱柱的清洗
柱压升高，保留时间变化和柱效降低都是色谱柱被污染的表现。
多数情况下，通过正确的冲洗能够解决上述问题。我们需要谨记的是越早冲洗或再生越会更容易的解决上述问题。
通常具有较强吸附的杂质都集中在色谱柱进口一端，zui简单的方法是对色谱柱进行反冲。反冲的方法只对填装紧密的色谱柱有效，柱性能也不会发生变化。
反冲时，请按照下述的一般步骤，使用特定溶剂对色谱柱进行清洗，并根据不同厂商的建议进行，以免损坏色谱柱。
| 反相柱(c18, c18(w), c8,c4,c1, phenyl, phenylhexyl) | 未键合的硅胶柱(sil) |
| 使用10 倍柱体积的如下溶剂依次清洗 a. 水: 乙腈=95:5 b. 四氢呋喃 c. 乙腈: 水=95:5 d. 不含盐的流动相 e. 流动相 | 使用10 倍柱体积的如下溶剂依次清洗 a. 异丙醇 b. 甲醇 c. 乙酸乙酯 d. 流动相 |
| 键合正相柱(cn, diol) | 用于蛋白/ 多肽分析的反相柱(c18, c18(w), c8,c4,c1, phenyl, phenylhexyl) |
| 使用10 倍柱体积的如下溶剂依次清洗 a. 三氯jia烷 b. 异丙醇 c. 二氯甲烷 d. 流动相 | a. 使用20 倍柱体积的不含盐流动相进行清洗 b. 梯度清洗 流动相a: 0.1%tfa 水溶液 : 乙腈=95 : 5流动相b: 0.1%tfa 乙腈: 异丙醇=1 : 2 在30 min 内，b 相从25% 升至100% 进行清洗，运行2 个梯度程序。 c. 流动相平衡，切勿将色谱柱保存在tfa 中 |
反冲时，请将流动相流速将至正常流速的1/10-1/5, 并断开检测器。反冲时，请将流动相流速将至正常流速的1/10-1/5, 并断开检测器。
kromasil 保护柱
色谱柱一旦污染，冲洗过程将非常耗时，建议使用保护柱减少对色谱柱的污染，
kromasil 保护柱 :
• 与kromasil 色谱柱具有相同的填料，*佳保护色谱柱，同时不影响分析结果。
• 柱芯柱套式设计，成本低。
部分常规保护柱订货信息
| 货号 | 描述 |
| 00000hho | 2.1-4.6 mm guard holder |
| 00000kco | 2.1-21.2 mm guard coupler |
| m05clngc | kromasil 100-5 -c18 3.0-4.6 mmguard cartridges (5 pack) |
| m05clnsk | kromasil 100-5 -c18 3.0-4.6 mmguard starter kit |
| m05cmngc | kromasil 100-5 -c8 3.0-4.6 mmguard cartridges (5 pack) |
| m05cmnsk | kromasil 100-5 -c8 3.0-4.6 mmguard starter kit |
| m05csngc | kromasil 100-5 -c4 3.0-4.6 mmguard cartridges (5 pack) |
| m05csnsk | kromasil 100-5 -c4 3.0-4.6 mmguard starter kit |
| m05nhngc | kromasil 100-5 -nh2 3.0-4.6 mmguard cartridges (5 pack) |
| m05nhnsk | kromasil 100-5 -nh2 3.0-4.6 mmguard starter kit |
| m05phngc | kromasil 100 -5 -phenyl 3.0-4.6 mm guard cartridges (5 pack) |
| m05phnsk | kromasil 100-5 -phenyl 3.0-4.6mm guard starter kit |
| s05cnngc | kromasil 60-5 -cn 3.0-4.6 mm guard cartridges (5 pack) |
| s05cnnsk | kromasil 60-5 -cn 3.0-4.6 mmguard starter kit |
| m05singc | kromasil 100-5 -sil 3.0-4.6 mmguard cartridges (5 pack) |
| m05sinsk | kromasil 100 -5 -sil 3.0-4.6 mm guard starter kit |
| s05dingc | kromasil 60-5 - diol 3.0-4.6 mm guard cartridges (5 pack) |
| s05dinsk | kromasil 60 -5 -diol 3.0-4.6 mm guard starter kit |
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